Question
Download Solution PDFनिम्न कथनें DNA अल्पावयव आधारित स्थल-निर्देशित उत्परिवर्तजनन के सन्दर्भ में बनाया गया, जिसका उपयोग एक जीन में एक एकल अथवा कुछ क्यूक्लियोटाइडों को परिवर्तित करने में किया जाता है:
A. एक प्रद्रव्य (plasmid) में क्लोन किए गये जीन का रूपदा (template) जैसा उपयोग करके, समपूरक उपक्रामकों का प्रयोग करके (जिसमें वांक्षित उत्परिवर्तन हैं) प्रतिलोम PCR किया गया इसके पश्चात अभिक्रिया सम्मिश्र से जीवाणु कोशिकाओं का प्रत्यक्ष रूपान्तरण किया गया एक बहुसंख्यक रूपान्तरितों में वन्य प्रूप जीन होंगें
B. एक प्रद्रव्य में क्रोन किए गये जीन का रूपदा जैसा उपयोग करके, समपूरक उपक्रामकों का प्रयोग करके (जिसमें वांक्षित उत्परिवर्तन हैं) प्रतिलोम PCR किया गया अभिक्रिया सम्मिश्र को Dpn I से उपचारित किया गया तथा फिर उनका उपयोग जीवाणु कोशिकाओं के रूपान्तरण में किया गया अधिकांश रूपान्त्तरितों में उत्परिवर्तित जीन होगें
C. एक प्रद्रव्य में क्लोन किए गये जीन का रूपदा जैसा उपयोग करके, समपूरक उपक्रामकों का प्रयोग करके (जिसमें वांक्षित उत्परिवर्तन है) प्रतिलोम PCR किया गया इसके पश्चात अभिक्रिया सम्मिश्र से जीवाणु कोशिकाओं का रूपान्तरण किया गया किसी भी रूपान्तरितों में उत्परिवर्तित जीन कहीं होगें
D. एक प्रद्रव्य में क्रोन किए गये जीन का रूपदा जैसा उपयोग करके, समपूरक उपक्रामकों का प्रयोग करके (जिसमें वांक्षित उत्परिवर्तन हैं) प्रतिलोम PCR किया गया अभिक्रिया संम्मिश्र को Dpn I से उपचारित किया गया तथा फिर उनका उपयोग जीवाणु कोशिकाओं के रूपान्तरण में किया गया आधे रूपान्तरित कोशिकाओं में उत्परिवर्तित जीन होगें
निम्नांकित कौन सा एक विकल्प सभी सटीक कथनों के मेल को दर्शाता है?
Answer (Detailed Solution Below)
Detailed Solution
Download Solution PDFअवधारणा:
- दूसरी दिशा में इंगित प्राइमरों का उपयोग करके, व्युत्क्रम PCR एक अज्ञात अनुक्रम क्षेत्र के प्रवर्धन को सक्षम बनाता है।
- इस दृष्टिकोण को पहले से क्लोन किए गए अनुक्रमों में उत्परिवर्तन सम्मिलित करने के लिए संशोधित किया जा सकता है।
- एक पूर्ण वृत्ताकार प्लाज्मिड को, इच्छित परिवर्तन को सम्मिलित करने वाले प्राइमरों का उपयोग करके, आवश्यक अनुक्रम को हटाने, प्रतिस्थापित करने या सम्मिलित करने के लिए प्रवर्धित किया जाता है।
- साइट-निर्देशित उत्परिवर्तन की अत्यंत अनुकूलनीय विधि का उपयोग लक्षित तरीके से विशेष न्यूक्लियोटाइड प्रतिस्थापन (या विलोपन) को सम्मिलित करने के लिए किया जा सकता है ।
स्पष्टीकरण:
कथन A:- सही
- प्रवर्धन के बाद, PCR प्रतिक्रिया मिश्रण में DNA स्ट्रैंड मूल, गैर-उत्परिवर्तित, मिथाइलेटेड DNA स्ट्रैंड और उत्परिवर्तित, अमिथाइलेटेड DNA स्ट्रैंड का मिश्रण होगा।
- जीवाणु एक बेमेल मरम्मत प्रक्रिया का उपयोग करेगा जिसमें मिश्रण को सीधे जीवाणु कोशिका में पहुंचाने पर बेमेल को सुधारने के लिए संदर्भ के रूप में मिथाइलेटेड DNA स्ट्रैंड का उपयोग किया जाता है।
- चूंकि उत्परिवर्ती किस्में PCR के दौरान बनाई गई थीं और इसलिए अमेथिलेटेड हैं, इसलिए मिसमैच रिपेयर सिस्टम उन्हें सही करने में सक्षम होगा, जिसके परिणामस्वरूप वाइल्ड-टाइप जीन वाले ट्रांसफॉर्मेंट की एक महत्वपूर्ण संख्या होगी।
कथन बी:- सही
- उपर्युक्त समस्या को हल करने के लिए, व्युत्क्रम प्राइमरों का उपयोग करके PCR प्रवर्धन के बाद डीपीएनआई पाचन द्वारा गैर-मिथाइलेटेड PCR उत्पाद से मिथाइलेटेड टेम्पलेट DNA को हटा दिया जाता है।
- PCR उत्पाद को पॉलीन्यूक्लियोटाइड काइनेज द्वारा फॉस्फोराइलेट किया जाता है, तथा उसके बाद उसे लिगेशन द्वारा पुनःपरिसंचरणित किया जाता है, तथा ई. कोली में रूपांतरित किया जाता है।
- परिणामस्वरूप, उत्परिवर्ती जीन युक्त बड़ी संख्या में ट्रांसफॉर्मेंट का उत्पादन होता है।
कथन C:- गलत
- PCR के बाद जीवाणु कोशिकाओं का सीधे प्रतिक्रिया मिश्रण के साथ रूपांतरण किया जाता है। बड़ी संख्या में ट्रांसफॉर्मेंट में वाइल्ड-टाइप जीन होगा।
कथन D:- गलत
- PCR मिश्रण को डीपीएन I के साथ उपचारित किया जाता है और फिर जीवाणु कोशिकाओं को बदलने के लिए उपयोग किया जाता है। अधिकांश ट्रांसफॉर्मेंट में उत्परिवर्तन जीन होगा।
इसलिए सही उत्तर विकल्प A (A और B) है ।
Last updated on Jun 22, 2025
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