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ऊपर दर्शाए गए प्लास्मिड में, एक बाहरी डीएनए का टुकड़ा EcoRI स्थल पर डाला गया है। पुनर्संयोजक कॉलोनियों का चयन करने के लिए निम्नलिखित में से किस रणनीति का चयन किया जाएगा?

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NEET 2025 Official Paper (Held On: 04 May, 2025)
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  1. एम्पीसिलीन और टेट्रासाइक्लिन युक्त माध्यम प्लेट का उपयोग करना।
  2. नीले रंग की कॉलोनियों का चयन किया जाएगा।
  3. सफेद रंग की कॉलोनियों का चयन किया जाएगा।
  4. एम्पीसिलीन प्लेटों पर उगाई गई नीले रंग की कॉलोनियों का चयन किया जा सकता है।

Answer (Detailed Solution Below)

Option 3 : सफेद रंग की कॉलोनियों का चयन किया जाएगा।
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Detailed Solution

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सही उत्तर है - सफेद रंग की कॉलोनियों का चयन किया जाएगा।

अवधारणा:

  • प्लास्मिड वृत्ताकार द्विकुंडलीय डीएनए अणु होते हैं जिनका उपयोग आणविक जीव विज्ञान में आनुवंशिक अभियांत्रिकी  और क्लोनिंग उद्देश्यों के लिए किया जाता है। वे अक्सर चयनीय चिह्नक जीन, जैसे प्रतिजैविक प्रतिरोध जीन, और विदेशी डीएनए के सम्मिलन के लिए प्रतिबंध स्थल ले जाते हैं।
  • जब एक विदेशी डीएनए खंड को एक विशिष्ट प्रतिबंध एंजाइम स्थल (जैसे, EcoRI स्थल) पर एक प्लास्मिड में डाला जाता है, तो प्लास्मिड पुनर्संयोजक बन जाता है।
  • पुनर्संयोजक प्लास्मिड की पहचान करने का एक सामान्य तरीका ब्लू-व्हाइट स्क्रीनिंग नामक प्रक्रिया का उपयोग करना है, जो β-गैलेक्टोसिडे को कूटलेखन करने वाले lacZ जीन के विघटन पर आधारित है।

व्याख्या:

सफेद रंग की कॉलोनियों का चयन किया जाएगा:

  • ब्लू-व्हाइट स्क्रीनिंग में, प्लास्मिड में lacZ जीन तब बाधित हो जाता है जब एक विदेशी डीएनए खंड को EcoRI स्थल पर डाला जाता है।
  • विघटन β-गैलेक्टोसिडे के उत्पादन को रोकता है, जो एक एंजाइम है जो X-gal (एक कृत्रिम क्रियाधार) को एक नीले रंग के उत्पाद में परिवर्तित करने के लिए उत्तरदायी है।
  • नतीजतन, पुनर्संयोजक प्लास्मिड वाली कॉलोनियाँ सफेद दिखाई देती हैं, जबकि गैर-पुनर्संयोजक कॉलोनियाँ (जहाँ lacZ अक्षुण्ण है) नीली दिखाई देती हैं। सफेद कॉलोनियों का चयन करने से यह सुनिश्चित होता है कि विदेशी डीएनए युक्त पुनर्संयोजक प्लास्मिड की पहचान की जाती है।

अन्य विकल्प गलत क्यों हैं:

  • एम्पीसिलीन और टेट्रासाइक्लिन युक्त माध्यम प्लेट का उपयोग करना: जबकि प्रतिजैविक चयन (जैसे, एम्पीसिलीन प्रतिरोध) का उपयोग अक्सर रूपांतरित जीवाणु में प्लास्मिड की उपस्थिति सुनिश्चित करने के लिए किया जाता है, यह विधि पुनर्संयोजक और पुनर्संयोजक प्लास्मिड के बीच अंतर नहीं करती है। यह केवल उन जीवाणु का चयन करता है जिनमें प्लास्मिड होता है।
  • नीले रंग की कॉलोनियों का चयन किया जाएगा: नीली कॉलोनियाँ पुनर्संयोजक प्लास्मिड को इंगित करती हैं जहाँ lacZ जीन अक्षुण्ण और कार्यात्मक है। इन कॉलोनियों में डाला गया विदेशी डीएनए नहीं होता है और ये वांछित पुनर्संयोजक नहीं हैं।
  • एम्पीसिलीन प्लेटों पर उगाई गई नीले रंग की कॉलोनियों का चयन किया जा सकता है: नीली कॉलोनियाँ गैर-पुनर्संयोजक प्लास्मिड का प्रतिनिधित्व करती हैं। इसके अतिरिक्त, जबकि एम्पीसिलीन प्लास्मिड युक्त जीवाणु का चयन करता है, यह पुनर्संयोजक और पुनर्संयोजक कॉलोनियों के बीच अंतर नहीं करता है।
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